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樣本ELISA試劑盒的收集方法

點擊次數(shù):12694   發(fā)布時間:2015/8/19 14:23:16

 在收集標(biāo)本前都必須有一個完整的計劃,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。新鮮標(biāo)本應(yīng)盡早檢測,對收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測的標(biāo)本,應(yīng)及時儲存在4℃?zhèn)溆。如因特殊原因需要定期、多次收集?biāo)本,請取材后,將標(biāo)本及時分裝后放在-20℃或以下條件下保存。由于蛋白樣品多不穩(wěn)定,極易降解,應(yīng)避免反復(fù)凍融,以減少對實驗的影響。
1.液體類標(biāo)本
液體類標(biāo)本包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
尿液:用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(pH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
2.組織標(biāo)本:
采集標(biāo)本后,稱取組織凈重,用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆。?biāo)本融化后要保存在2-8℃的溫度,加入一定量的PBS(pH7.2-7.4),用手工或電動勻漿器將標(biāo)本充分勻漿。4℃離心(10000-15000轉(zhuǎn)/分)10-20分鐘。收集上清,留取適量檢測,其余冷凍保存?zhèn)溆谩?/span>
備注:如果樣本中的待檢物需要提純,請客戶自行處理。

原創(chuàng)作者:上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司

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