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恒遠為你解析ELISA原理

閱讀次數:1359   發(fā)布時間:2012/7/19 11:19:21

恒遠為你解析ELISA原理

  elisa技術流程

elisa技術流程

  ELISA試劑盒的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應的結果,使測定方法達到很高的敏感度。 ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。

 

  然而,影響Elisa試驗結果的因素很多,故加強各個環(huán)節(jié)的質量保證才能充分發(fā)揮其方法學的優(yōu)點。

試驗原理

  試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關系

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試劑盒:ELISA試劑盒、檢測試劑盒、免疫組化試劑盒、分子生物學試劑盒、金標檢測試劑盒、細胞凋亡試劑盒、生化試劑盒等。
各種動物血清:內皮細胞專用血清、國產血清、GIBCO胎牛血清等。
抗體:進口原裝抗體、進口分裝抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、單標抗體、雙標抗體、多標抗體、一抗、二抗;免疫組化抗體、免疫熒光抗體、流式細胞抗體、免疫細胞化學抗體等。
細胞:原裝進口細胞、腫瘤細胞、正常細胞、腫瘤耐藥細胞等。
培養(yǎng)基:顯色培養(yǎng)基、大腸桿菌培養(yǎng)基、干燥培養(yǎng)基、其它菌檢測培養(yǎng)基等等。

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