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Saponin Lysis of RBCs

閱讀次數(shù):1539   發(fā)布時(shí)間:2012/9/7 9:24:06

酶聯(lián)免疫試劑盒,國內(nèi)許多企業(yè),單位,為迎接國慶節(jié)和中秋節(jié),從現(xiàn)在起,所有產(chǎn)品以較低的價(jià)格賣出,客戶反饋,但購買的酶聯(lián)免疫試劑盒,我們免費(fèi)代測測試服務(wù),歡迎咨詢">Shanghai Heng Yuan biotechnology limited company is located in the Whampoa  River, is the first domestic dealers and ELISA kit, many domestic enterprises, units, in order to meet the national day and the Mid-Autumn Festival, from now on, all products sold at a lower price, customer feedback, but the purchase of ELISA kit, we free generation of testing services, welcomed the Advisory

Abstract

Lyse red blood cells while leaving the Plasmodium falciparum parasite intact with it''s parasite membrane and parasitophorous vacoule membrane. Typically used right before freezing down parasites for genomic DNA extraction, or for getting rid of hemoglobin right before running a Western Blot on parasite extracts.

Reagents

  • 0.15% Saponin in PBS
  • 1X PBS
  • 12 mL of Plasmodium falciparum blood culture at 4% hematocrit

Equipment

  • Refrigerated centrifuge capable of holding 15 mL conical tubes
  • Microcentrifuge

Procedure

  1. Centrifuge parasite culture at 1400 rpm (~484xg) for 3 minutes.
  2. Aspirate media.
  3. Resuspend pellet in 1 ml of 0.15% Saponin (in aliquots in freezer) and transfer to a 1.5 ml eppendorf tube.
  4. Incubate for 5 minutes on ice and vortex each minute.
  5. Spin at 6000 rpm for 3 minutes at 4 degrees C.
  6. Wash with 1 ml 1X PBS (spin at 6000 rpm for 3 minutes) 3 to 4 times.
    1. Each wash step consists of aspirating the supernatant and resuspending the pellet with new wash buffer, before centrifuging.
  7. Aspirate off last wash.
  8. Store at -20 degrees C until ready to use.

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