人甘露聚糖結(jié)合凝集素相關(guān)絲氨酸蛋白酶（MASP）elisa試劑盒操作問(wèn)題：

試劑準(zhǔn)備不當(dāng)可能影響酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定ELISA結(jié)果

在實(shí)驗(yàn)室，對(duì)試劑準(zhǔn)備一般不太注意，通常的做法是，在實(shí)驗(yàn)時(shí)將試劑從冰箱中拿出來(lái)即用，而忽略了這種做法有可能影響后面溫育時(shí)間不夠的問(wèn)題，其直接的后果是對(duì)一些弱陽(yáng)性標(biāo)本的檢測(cè)出現(xiàn)假陰性。

因此，在ELISA測(cè)定中試劑的準(zhǔn)備*為關(guān)鍵的是，在實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，將試劑盒先從冰箱中拿出來(lái)，在室溫下放置20min以上后，再進(jìn)行測(cè)定，以使試劑盒在使用前與室溫平衡。這樣做的目的，主要是為了在后面的溫育反應(yīng)步驟中，能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所要求的高度，以滿(mǎn)足測(cè)定要求。其次，目前的商品ELISA試劑盒中的洗板液均需在實(shí)驗(yàn)室使用時(shí)對(duì)所提供的濃縮液稀釋配制，因此稀釋時(shí)所用的蒸餾水或去離子水應(yīng)保證質(zhì)量。

此外，當(dāng)試劑盒以O(shè)PD為底物時(shí)，則底物溶液應(yīng)在反應(yīng)顯色前臨時(shí)配制。

樣品要求

·客戶(hù)需提供待檢測(cè)抗體和包被用抗原。

·檢測(cè)的樣本為細(xì)胞培養(yǎng)上清、人和動(dòng)物的血清、血漿。

·樣本收集后應(yīng)立即-20℃保存，若長(zhǎng)期保存應(yīng)-70℃。

·樣本量的要求：若一個(gè)指標(biāo)做復(fù)孔檢測(cè)應(yīng)不少于250ul，做單孔檢測(cè)應(yīng)不少于120ul。建議若客戶(hù)樣本量充足提供500ul以上。

·客戶(hù)的樣本收集后，立即按要求保存，切忌反復(fù)凍融。外地客戶(hù)郵寄需要用干冰運(yùn)輸。郵寄前請(qǐng)與技術(shù)支持溝通確認(rèn)。

回收率

elisa試劑盒回收率是反應(yīng)待測(cè)物在樣品分析過(guò)程中的損失的程度，損失越少，回收率越高，如果作標(biāo)液1PPM，就是1毫克/升，而作出標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)為0.99毫克/升，就是說(shuō)你的回收率是99%，這個(gè)與真實(shí)成分有密切的關(guān)系，說(shuō)明方法的準(zhǔn)確度。比如水中總無(wú)機(jī)氯含量測(cè)定,樣品水中含有無(wú)機(jī)氯20mg/L,取100mL被測(cè)水樣品,加入0.1mL濃度為10mg/mL的含無(wú)機(jī)氯標(biāo)準(zhǔn)樣品,測(cè)定時(shí)忽略體積變化,如果測(cè)定出樣品中無(wú)機(jī)氯為2.98mg/L,則認(rèn)為回收率為98%。

對(duì)于定量檢測(cè)來(lái)說(shuō)，主要還是一個(gè)準(zhǔn)確度的驗(yàn)證。不過(guò)我看到別人寫(xiě)的內(nèi)容比我自己想說(shuō)的要好，所以就貼上去了。相對(duì)回收率可能會(huì)高于100%的，如果只是說(shuō)“損失程度”，其實(shí)是不準(zhǔn)確的。應(yīng)該說(shuō)，回收率越接近100%，說(shuō)明這個(gè)試劑盒的準(zhǔn)確度越高。

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更新時(shí)間：2024/10/8 9:18:38